Биосенсорные материалы на основе полимерных пленок с иммобилизованными производными краун-эфиров 03. 01. 04-биохимия 03. 01. 06-биотехнология (в том числе бионанотехнологии)
| скачать На правах рукописи Тимонин Андрей Николаевич Биосенсорные материалы на основе полимерных пленок с иммобилизованными производными краун-эфиров 03.01.04-биохимия 03.01.06-биотехнология (в том числе бионанотехнологии). Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва - 2010 Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ) ^ доктор биологических наук, доктор химических наук, профессор Зайцев Сергей Юрьевич; доктор химических наук, профессор ^ Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Еремец Владимир Иванович доктор ветеринарных наук, профессор Преображенский Сергей Николаевич ^ Федеральное государственное учреждение "Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов" (ФГУ "ВГНКИ") Защита диссертации состоится « 2 » марта 2011 г. в 12 30 часов на заседании диссертационного совета Д 220.042.04 в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» по адресу: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23. Тел.: (495) 377-93-83 С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» Автореферат разослан «_31__» _января_2011 г. и размещен на сайте http://mgavm.ru Ученый секретарь диссертационного совета В.Д. Фомина ^ Актуальность темы. Использование принципов организации и функционирования биологических мембран для создания хемосенсорных материалов (ХМ) с целью оптического контроля биохимически активных веществ в настоящее время является одной из активно развивающихся областей науки, «на стыке» биологической и биоорганической химии, физической и коллоидной химии, биомедицины и бионанотехнологии [Штильман М.И., 2006; Зайцев С. Ю., 2010 и др.]. Одним из подходов для создания хемосенсорных материалов является приготовление композиций на основе ряда необходимых компонентов (хромоионофора и одного или нескольких полимеров и/или сополимеров) для конкретных применений. Действие оптических хемосенсоров основано на измерении поглощения и флуоресценции фоточувствительного реагента при контакте сенсора с определяемым биологически-активным веществом, так называемым «аналитом» [Алфимов М.В., 1997; Громов С.П., 2007 и др.]. Мониторинг как окружающей среды, так и физиолого-биохимического статуса живых организмов становится все более актуальной и важной задачей по мере развития промышленности, производства медицинских и ветеринарных препаратов [Алыкова, Т.В., 2002; Ермаков В.В., 2008 и др.]. Еще одной актуальной проблемой является создание материалов диагностических систем для «микроробота», работающего непосредственно внутри сосудов человека и животных. Данная работа проводилась в рамках проекта «2007-3-2.3-11-02-003» по федеральной научно-технической целевой программе ФНТЦП Минобрнауки РФ «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технического комплекса России на 2007-2012 годы» по теме «Создание системы очувствления внутрисосудистого микроробота для сбора информации о ситуации внутри полости биообъекта» на 2007-2009 г.г. кафедры органической и биологической химии ФГОУ ВПО МГАВМиБ (совместно с МГТУ имени Н.Э. Баумана и ЦФ РАН). Цель работы – разработка методики, получение и исследование хемосенсорных наноструктурированных материалов на основе фоточувствительных производных краун-эфиров для детекции аминокислот и катионов кальция. Исходя из этой цели, были поставлены задачи: 1. Получить и исследовать хемосенсорные материалы (ХМ) на основе синтетических и биологических полимеров, в том числе — с включением биоорганических соединений типа азокраун-эфирных производных стириловых красителей (КЭ). Изучить оптические свойства этих соединений в различных биополимерных матрицах. Оптимизировать методы получения и свойства ХМ. 2. Провести спектральный анализ хемосенсорных материалов с КЭ №5 в присутствии ряда аминокислот. 3. Разработать экспериментально-расчетные подходы и методики исследования комплексообразования производных краун-эфиров с катионами кальция. 4. Разработать рецептуру получения хемосенсорных материалов на основе желатина и иммобилизованных в него производных краун-эфиров. 5. Оценить перспективность полученных монослоев и краун-содержащих композитных материалов с основой из биополимерной матрицы и для создания сенсорных элементов устройств оптического контроля щелочноземельных металлов (на примере кальция) и малых органических молекул (на примере аминокислот). ^ . Разработан экспериментально-расчетный метод (ЭРМ) для математического описания процессов при исследовании и получении ХМ. Разработана новая методика исследования производных краун-эфиров, селективных к катионам кальция, названная «методом контролируемой диффузии» (МКД). Посредством данной методики были изучены особенности процесса комплексообразования некоторых производных краун-эфиров с катионами кальция. Предложена новая рецептура получения сенсорных материалов на основе двух типов краун-эфиров, иммобилизованных в пленку из желатина. ^ Получены фундаментальные результаты по фоточувствительным свойствам краунсодержащих стириловых красителей в полимерных матрицах при взаимодействии с катионами кальция и рядом аминокислот. Получены краунсодержащие композитные материалы для создания сенсорных элементов устройств оптического контроля катионов кальция и ряда аминокислот. Результаты диссертационной работы используются для обучения студентов 3, 4 и 5 курсов и магистров ветеринарно-биологического факультета и в рамках НОЦ (ГК № 02.740.11.0270 и ГК № 02.740.11.0718) ФГОУ ВПО МГАВМиБ в учебных курсах «Биохимия», «Физическая и коллоидная химия», «Спектральные методы исследования» и «Бионанотехнологии». Результаты работы использованы совместно с МГТУ имени Н.Э. Баумана и ЦФ РАН в рамках гос. контракта №02.523.12.3009 «Создание микророботехнического комплекса на основе внутрисосудистого микроробота для осуществления диагностических, терапевтических (доставка лекарственных препаратов) и хирургических процедур при атеросклеротических заболеваниях трубчатых органов», включая совместный патент РФ № 2389745 (см. список работ). ^
^ Основные материалы диссертации были доложены на III международной конференции по коллоидной химии и физико-химической механике (МГУ, Москва, 2008); на международной научно-практической конференции «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ, Москва, 2008); на конференциях молодых ученых и семинарах в ФГОУ ВПО МГАВМиБ (2006-2009); на V Каргинской конференции (МГУ, Москва, 2010); на V Международной научной конференции «Актуальные проблемы в животноводстве» (ГНУ ВНИИФБиП с./х. животных, Боровск, 2010);на 2-й международной молодежной школе-конференции по физической химии краун-соединений, порфиринов и фталоцианинов (Туапсе, 2010). Публикации. По материалам диссертации опубликовано 14 печатных работ, из них 6 статей (в т.ч. 2 - в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК), 7 тезисов докладов на российских и международных конференциях, 1 патент РФ. ^ Все этапы работы, включая разработку методик, проведение эксперимента, обработку и анализ полученных результатов были проведены лично автором или при его непосредственном участии. ^ Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов экспериментов и их обсуждения, выводов, списка литературы и приложения. Материалы диссертационной работы изложены на 125 страницах машинописного текста и включают 34 рисунка и 18 таблиц. Список литературы содержит 87 источников (из них 30 отечественных и 57 зарубежных). ^ Материалы и методы В работе использовали следующие реактивы: Биоорганические соединения на основе фоточувствительных краун-эфиров (КЭ), синтезированные в Центре Фотохимии РAH (табл. 1). Таблица 1. Фоточувствительные биоорганические соединения.
Полимеры: целлюлозы ацетатгидрофталат (ЦАГФ), целлюлозы ацетатбутират (ЦАБ), поливинилбутираль (ПВБ), полистирол (ПС), поливинилхлорид (ПВХ); также в работе использовались, помимо полимерных, гелевые матрицы на основе желатина. Растворители: ацетон, хлороформ, ацетонитрил, дихлорэтан, метанол. Соли: перхлораты кальция и натрия СaClO42, NaClO4, хлориды кальция и натрия NaCl, CaCl2. Аминокислоты: глицин, фенилаланин, аланин, серин, аргинин, изолейцин, лизин. Методики получения полимерных пленок: из приготовленных растворов полимеров и КЭ по стандартной и модифицированной методикам готовили тонкие пленки ХМ на стеклянных и кварцевых подложках (для получения спектров поглощения и флуоресценции). Спектры поглощения получали на спектрофотометрах «Hitachi 330» и «Helios β», спектры флуоресценции - на спектрофлуориметрах «Hitachi 550» и «Shimadzu RF 5000». Сравнивали спектры поглощения и флуоресценции чистого полимера и полимера с добавлением КЭ в области 300-700 нм. В пленке, где присутствует КЭ, наблюдали появление характерного выраженного пика, максимум которого регистрировали при соответствующей длине волны. Затем пленки, содержащие КЭ, подвергали воздействию водных растворов солей катионов кальция или аминокислот с разной концентрацией в течение от 10 до 60 мин. Снова записывали спектры поглощения и флуоресценции и фиксировали изменения интенсивности и длины волны максимума поглощения и флуоресценции. Монослои КЭ-5 в смеси со стеариновой кислотой (С18) в соотношении КЭ-5:С18, равном 1:2 получали и исследовали методами Ленгмюра-Блоджет и Вильгельми. Для исследования фоточувствительных свойств монослоев применяли спектральные методы. Статистическую обработку проводили с помощью пакета программ "Статистика". Значения критерия достоверности определяли на основе распределения Стьюдента с учётом принятого для научных экспериментов уровня значимости 0,05*, 0,01**, 0,001***. ^ В работе использовали полимерные матрицы с иммобилизованными КЭ, которые, при контакте с биогенными «аналитами», дают молекулярные комплексы. Такую систему можно рассматривать как продукт бионанотехнологий, поскольку все реагенты образуют наноразмерные комплексы, а процесс получения хемосенсорного материала проводится по оригинальной технологии. ^ Достоинством получения пленок методом полива является его простота. Однако необходимым условиям метода является растворимость полимера и КЭ в одинаковых растворителях, что не всегда осуществимо. С целью повышения чувствительности ХМ и экономии КЭ была разработана модифицированная методика, суть которой состоит в следующем. При стандартном методе получения пленок из раствора (содержащего одновременно и полимер, и КЭ) КЭ распределяется в полимерной матрице равномерно по всей толщине. Поскольку среда пленки гидрофобна, то это создает препятствия для проникновения катиона растворенного в воде «аналита» вглубь пленки. В модифицированном методе изготавливают двухслойную пленку, первый слой которой получен из раствора полимера, а второй — из раствора КЭ, причем могут быть использованы разные растворители. В такой пленке концентрация КЭ в поверхностном слое возрастает, что приводит к повышению чувствительности ХМ и подтверждается спектральными данными (рис.1).
Рисунок 1. Спектры поглощения КЭ №5 в пленках ЦАГФ до (кривая 1) и после (кривая 2) контакта с раствором «аналита», полученные по стандартной (а) и модифицированной (б) методике. Приложение экспериментально-расчетного метода (ЭРМ) для определения глубины иммобилизации КЭ в ЦАФ. Получение полимерных матриц с иммобилизованными в них КЭ требует информации о характере этого процесса в зависимости от выбранной технологии получения ХМ. В частности, важной информацией является глубина вещественной иммобилизации в матричное окружение. Принцип ЭРМ состоит в выборе основной модели исследования, целью которой является установление основных закономерностей процессов пленкоформирования, с последующим предложением эмпирической расчетной формулы. Для формирования пленок, ведущим механизмом которого является отношение кинетики испарения растворителя и растворения полимера, была установлена эмпирическая расчетная формула для системы ЦАФ/ацетон: ω= m:(m+ρ(V0 -10-2eω% )), где ω – массовая доля полимера, m – масса полимера, растворенного раствором КЭ, ω% - массовая доля полимера, выраженная в процентах, ρ – плотность растворителя (г/мл), V0 – начальный объем раствора КЭ (мл). Эта формула связывает массовую долю раствора с массой растворенного полимера, что позволяет рассчитать толщину проникновения КЭ в пленку (толщина активной зоны) h: h=(m/m0)·h0, где h – толщина активной зоны, m – максимальная масса растворенного полимера, m0 – общая масса полимера пленки, h0 – общая толщина полимерной пленки. Для системы ЦАФ/ацетон толщина активной зоны составляет 1,45 мкм. ^ Для получения спектров флуоресценции использовали пленки ЦАФ, содержащие КЭ №5, толщиной 10 мкм, отлитые на кварцевых подложках. Использовались растворы следующих аминокислот с концентрацией 1 мМ: глицин, фенилаланин, аланин, серин, аргинин, изолейцин, лизин. В спектрах флуоресценции ЦАФ с КЭ №5 наблюдается максимум флуоресценции при длине волны λ= 512 нм (на рис. 2 пунктирная кривая 1).
Данные из спектров флуоресценции ХМ, содержащих КЭ №5, до и после взаимодействия с аминокислотами, приведены в таблице 2. Таблица 2. Флуоресценция полимерных пленок на основе ЦАФ, содержащих КЭ № 5, до и после выдерживания в водных растворах аминокислот с концентрацией 1 мМ.
Видно, что после воздействия на полимерную матрицу ЦАФ с КЭ №5 водными растворами аминокислот в спектрах наблюдаются следующие сдвиги длины волны максимума флуоресценции: для раствора фенилаланина он составляет 12 нм, аргинина - 9 нм, для глицина и серина - 8 нм, изолейцина - 7 нм и аланина - 5 нм. Таким образом, наибольший сдвиг максимума флуоресценции наблюдается для раствора фенилаланина. Эти данные свидетельствуют о возможном использовании ХМ на основе ЦАФ и КЭ № 5 для возможной детекции аминокислот. Для получения наноразмерных пленок была использована альтернативная технология (Лэнгмюра). Этой технологией были получены монослои КЭ №5 со стеариновой кислотой (мольное соотношение 1:2) в присутствии и в отсутствие водного раствора лизина (концентрации лизина 1 мМ). Из сравнения спектров флуоресценции найден батохромный сдвиг на 2 нм, что не является достоверным доказательством процесса комплексообразования КЭ № 5 с лизином в монослоях. ^ Для получения спектров поглощения и флуоресценции использовали пленки ЦАФ, ЦАГФ, ПВБ, содержащие КЭ №3, КЭ №4, КЭ №6 толщиной 10 мкм, отлитые на кварцевых подложках. Данные по спектрам флуоресценции приведены на рис. 3 — 5.
Данные из спектров флуоресценции ХМ, содержащих КЭ №3, до и после взаимодействия с солями кальция, приведены в таблице 3. Таблица 3. Флуоресценция полимерных пленок на основе ЦАФ, ЦАГФ, ПВБ, содержащих КЭ №3, КЭ №4, КЭ №6 до и после выдерживания в растворах перхлората кальция с концентрацией 1 мМ.
Видно, что природа полимера оказывает существенное влияние на спектральные характеристики образцов. Для ХМ на основе ПВБ в присутствии КЭ № 3 и КЭ № 4 после взаимодействия с раствором перхлората кальция сдвиги не превышают 4 нм. После воздействия на полимерную матрицу ЦАФ с КЭ №6 водных растворов перхлората кальция в спектрах наблюдаются значительные сдвиги длины волны максимума флуоресценции (на 22 нм). Наибольшие изменения после контакта с раствором перхлората кальция наблюдаются для ХМ на основе ЦАГФ и КЭ №3 (max 24 нм). Наличие таких сдвигов максимума длины волны флуоресценции указывает на перспективность данной композиции для создания оптических сенсоров на катионы кальция. ^ Метод контролируемой диффузии (МКД) заключается в следующем. В пробирку последовательно наслаивают друг на друга три раствора: р1 - водный высококонцентрированный раствор перхлората кальция (раствор должен иметь высокую плотность); р2 - органический, несмешивающийся с водой раствор молекулярного сенсора с известной концентрацией и более низкой плотностью, чем р1; р3 - дистиллированная вода. При этом известны и строго фиксированы объемы данных растворов, а значит и их соотношение. По изменению окраски растворов судят о диффузии катионов кальция из водной среды в органическую и комплексообразовании катионов кальция с молекулярным сенсором. На примере КЭ №3 в хлороформе были поставлены эксперименты на базе МКД. Основные результаты, полученные в ходе разработки метода МКД, следующие. При контакте р2 и р1 цвет р2 из синего переходит в желтый (время полного изменения окраски 45 сек.). После контакта раствора р2 с р3 цвет р2 из желтого постепенно (начиная с контактирующей с р3 части) переходит в синий (время полного изменения окраски 60 сек.). Цвет устойчив и не меняется после 1 часа выдерживания. Однако после 24 часового выдерживания синий цвет р2 вновь переходит в желтый. Из раствора р3 отбирается проба и проводится комплексометрическое титрование, в соответствии с которым концентрация Са2+ в растворе равна 0,05М (т.е. 50 мМ). В процессе постановки данного эксперимента были выявлены два важных наблюдения: последовательное изменение цвета р2 (восстановление первоначального цвета) — эффект ретрохромии, и концентрационная асимметрия (существенная и стабильная во времени разница концентраций катиона кальция в р1 и р3 соответственно). На основе полученных на базе МКД результатов было выдвинуто предположение о характере комплексообразования КЭ №4 с катионом Са2+ – наличию концентрационного порога для Са2+, что связано с существенным влиянием водного окружения на комплексообразование между молекулами КЭ №4 и катионами Са2+. В случае, когда концентрация катионов кальция уменьшается ниже пороговой (<0,05M), процесс комплексообразования прекращается. Обоснование этого предположения – наличие устойчивой концентрационной асимметрии и эффекта ретрохромии в системе растворов МКД. ^ В данном разделе представлены важнейшие результаты исследования взаимодействия КЭ №3 в матрицах на основе желатина с перхлоратом и хлоридом кальция. На базе МКД были получены результаты, ставшие основой по предложению о замене матриц на полимерной основе желатиновыми матрицами. Также в эту систему был добавлен в расчетном соотношении дополнительный компонент – бензо-18-краун-6 (БК). Его функция была сведена к направленному связыванию воды, проникающей в систему вместе с солями кальция в процессе диффузии. Посредством данной технологии был снижен концентрационный кальциевый порог, выявленный на базе МКД для КЭ №3, с 50 мМ до 5 мМ. На рисунке 6 представлен спектр флуоресценции КЭ №3 в желатиновой пленке с системой сопряженных краун-эфиров.
На рис. 6 приведены данные спектров флуоресценции для КЭ №3, иммобилизованного в желатиновой системе в присутствии БК в отношении к КЭ №3 100:1 в присутствии хлорида кальция при концентрации 5 мМ. Наблюдается выраженный сдвиг максимума флуоресценции в гипсохромную область с 607 до 504 нм (Δλmax = -103 нм), что однозначно свидетельствует об образовании комплекса между КЭ №3 и кальцием. Также был снят спектр флуоресценции с контрольной желатиновой пленки (рис. 7), в которую иммобилизовали не КЭ №3, а приготовленный заранее его комплекс с кальцием – [КЭ №3+Са]. Из графика спектров флуоресценции (рис. 6,7) видно, что для готового комплекса [КЭ №3+Са], иммобилизованного в желатиновую систему, максимум флуоресценции соответствует 503 нм. Таким образом, значения максимума флуоресценции для желатиновой пленки с системой сопряженных краун-эфиров практически совпадают со значением максимума флуоресценции для желатиновой пленки с иммобилизованным готовым комплексом [КЭ №3+Са] (504 нм и 503 нм соответственно). Полученные результаты указывают на достоверность комплексообразования КЭ №3 в желатиновой системе КЭ№3/БК 1:100 с катионом кальция в водном растворе хлорида кальция с концентрацией 5 мМ. Выводы 1. Разработаны методики, получены и исследованы хемосенсорные материалы на основе синтетических и биологических полимеров, в том числе — с включенными биоорганическими соединениями типа азакраун-эфирных производных стириловых красителей, для детекции катионов кальция и аминокислот в биологических жидкостях. Изучены оптические свойства этих соединений в различных биополимерных матрицах, установлено влияние матрицы на сдвиги максимумов спектров поглощения и флуоресценции. Оптимизированы методы получения и свойства хемосенсорных материалов. 2. Установлено, что при комплексообразовании соединения №5 с рядом аминокислот (с концентрацией 1 мМ) в пленках целлюлозы ацетатфталата наблюдается сдвиг максимума флуоресценции в присутствии раствора аланина в длинноволновую область на 5 нм, изолейцина — на 7 нм, глицина и серина – на 8 нм, аргинина — на 9 нм, фенилаланина – на 12 нм, что перспективно для детекции аминокислот. 3. Разработан экспериментально-расчетный метод и методика исследования комплексообразования производных краун-эфиров с катионами кальция с использованием различных растворителей, названная «методом контролируемой диффузии». Посредством этого метода установлен первый концентрационный порог для определения катионов кальция с помощью исследованных производных краун-эфиров, равный 50 мМ. 4. Впервые получены наноструктурированные хемосенсорные материалы на основе желатина и иммобилизованных в него производного азакраун-эфира №4 и бензо-18-краун-6-эфира в массовом соотношении 1:100, что позволило регулировать молекулярные механизмы комплексообразования. Указанные бионанотехнологические решения позволили достичь в желатиновых матрицах сдвига флуоресценции на 103 нм в гипсохромную область для концентрации катионов кальция в водном растворе 5 мМ.
^ По материалам исследования разработаны: «Технологическая инструкция по изготовлению хемосеносрных бионанотехнологических пленок на основе желатина и иммобилизованного КЭ-3 для детекции катионов кальция», утвержденная ВНИТИБП РАСХН (21.10.2010г.); «Методика получения и характеристики лабораторных образцов бионанотехнологических материалов для сенсорных устройств», утвержденная научно-методическим советом ФГОУ ВПО МГАВМиБ (протокол № 22 от 16.12.2010). Основные результаты диссертации используются для обучения студентов 3, 4 и 5 курсов и магистров ветеринарно-биологического факультета ФГОУ ВПО МГАВМиБ в учебных курсах «Биохимия», «Физическая и коллоидная химия», «Спектральные методы исследования» и «Бионанотехнологии», и в рамках НОЦ ФГОУ ВПО МГАВМиБ (ГК 02.740.11.0270 и ГК 02.740.11.0718). Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Тимонин, А.Н. Модификация методики создания селективных хемосенсорных материалов на основе фоточувствительных производных краун-эфиров / Тимонин А.Н., Зайцев С.Ю., Царькова М.С. // Мат. Международной научно-практической конференции «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии».- М., 2008.- С. 111-115. 2.* Зайцев, С.Ю. Хемосенсорные оптоматериалы для определения диаминов на основе хромогенного краун-эфира, иммобилизованного в полимерные пленки / Зайцев С.Ю., Варламова Е.А., Царькова М.С., Бондаренко В.В., Тимонин А.Н., Ведерников А.И., Громов С.П., Алфимов М.В. // Известия вузов. Химия и химическая технология - 2009.-Т.52.-Вып.3.- С.65-69. 3. Тимонин, А.Н. Имитационное моделирование биопроцессов для создания сенсорных нанокомпозитных материалов / Тимонин А.Н., Мухамедкулова М.П., Царькова М.С., Бондаренко В.В., Зайцев С.Ю. // Актуальные проблемы ветеринарной биологии.-Сборник научных трудов.-М.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ, 2009.-С.52-54. 4. Варламова, Е.А. Получение полимерных матриц для оптических хемосенсоров / Варламова Е.А., Бондаренко В.В., Тимонин А.Н. // Юбилейный сборник трудов кафедры неорганической и аналитической химии, посвященный 90-летию кафедры и Академии «Малые дозы в биологии».-М:. ФГОУ ВПО МГАВМиБ - 2009.-С.41-46. 5.* Тимонин, А.Н. Разработка инновационных хемосенсорных нанокомпонентных материалов на основе фоточувствительных производных краун-эфиров посредством методов имитационного моделирования // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. -2010. Т.201. - С. 108-113. 6. Зайцев, С.Ю. Хемосенсорные нанокомпозитные материалы на основе фоточувствительных производных краун-эфиров: моделирование и применение /Зайцев С.Ю., Царькова М.С., Тимонин А.Н. // Нанотехнологии и охрана здоровья. - 2010. Т. 2. №3. С. 48-51. 7. Варламова, Е.А. Определение катионов щелочно-земельных металлов с помощью краун-эфиров, иммобилизованных в полимерные пленки / Варламова Е.А., Зайцев С.Ю., Царькова М.С., Бондаренко В.В., Тимонин А.Н., Громов С.П., Алфимов М.В. // Мат. Международной научно-практической конференции «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии».- Сборник тезисов.- М., 2008.- С. 20. 8. Бондаренко, В.В. Супрамолекулярные комплексы «полимер-краун-эфир» для определения диаминов / Бондаренко В.В., Зайцев С.Ю., Царькова М.С., Варламова Е.А., Тимонин А.Н., Громов С.П., Ведерников А.И. // Мат. Международной научно-практической конференции «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии».- Сборник тезисов.- М., 2008.- С.21. 9. Тимонин, А.Н. Модификация способа получения полимерных хемосенсорных материалов / Тимонин А.Н., Царькова М.С., Зайцев С.Ю., Варламова Е.А., Бондаренко В.В. // Мат. Международной научно-практической конференции «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии».- сборник тезисов.- М., 2008.- С.22. 10. Зайцев, С.Ю. Модифицированные нанокомпозитные материалы для определения катионов бария / Зайцев С.Ю., Царькова М.С., Варламова Е.А., Тимонин А.Н., Ведерников А.И., Громов С.П., Лобова Н.А. // Мат. III Международной конференции по коллоидной химии и физико-химической механике.- М., 2008.- С. 74. 11. Тимонин, А.Н. Определение катионов кальция и стронция с использованием полимерных матриц и модельных систем / Тимонин А.Н., Зайцев С.Ю. // Мат. V Всероссийской Каргинской конференции «Полимеры 2010», 21 – 25 июня 2010 г.-С. 49. 12. Тимонин, А.Н. Хемосенсорные композитные материалы для определения катионов кальция / Тимонин А.Н., Зайцев С.Ю. // Мат. V Международной конференции «Актуальные проблемы биологии в животноводстве».-Боровск.-2010.-С. 226-227. 13. Зайцев, С.Ю. Определение катионов кальция посредством желатиновых пленок с иммобилизированными краун-эфирами / Зайцев С.Ю., Царькова М.С., Тимонин А.Н., Зайцев И.С., Дмитриева С.Н., Громов С.П. // 2-я международная молодежная школа-конференция по физической химии краун-соединений, порфиринов и фталоцианинов. Сборник тезисов докладов. Туапсе, 2010. - С. 43-44. 14. Патент РФ № 2389745, опубл. 20.05.2010 г. Громов, С.П. Хемосенсорные оптоматериалы для определения катионов металлов большого ионного радиуса и ионов диаммония на основе краунсодержащих бисстириловых красителей, иммобилизованных в полимерные пленки, и способы их получения / Громов С.П., Зайцев С.Ю., Ведерников А.И., Ушаков Е.Н., Лобова Н.А., Кондратюк Д.В., Царькова М.С., Варламова Е.А., Бондаренко В.В., Тимонин А.Н., Алфимов М.В. (приоритет от 30.07.2008 г.) * - статьи в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ
|
отлично
1 