скачатьСтроение нуклеиновых кислот – NS-3-1Лекция 12 Пространственная структура одноцепочечных тРНК. Вторичная структура. Третичная структура. Пространственное строение. Принципы пространственного строения одноцепочечных РНК, основные энергетические детерминанты структуры. Условия существования третичной структуры. Взаимодействие нуклеиновых кислот с водой и противоионами. Гидрофильные группы ДНК. Особенности гидратации разных форм ДНК. Дегидрационная природа перехода А – В и разрушения регулярной структуры ДНК. Распределение электростатического потенциала вокруг ДНК. http://honiglab.cpmc.columbia.edu/ http://www.rtc.riken.go.jp/jouhou/image/gallery.html http://gibk26.bse.kyutech.ac.jp/jouhou/jouhoubank.html ^ [A.Jack, J.E.Lander, A.Klug J.Mol.Biol. 1976, v.108, 619-649] РНК – длинные одноцепочечные полирибонуклеотида тРНК – молекулы из ~ 100 рибонуклеотидов – участвует в биосинтезе белка ^ определена методом рентгеноструктурного анализа монокристаллов [A.Rich, M.Sundaralingam, A.Klug 1974-75] Вторичная структура – распределение структур рибозофосфатного скелета вдоль цепи. ^ – 3Д структура ТРНК – фен - вторичная структура - клеверный лист
Рис. 12-1. т-РНК-фен – нуклеотиды сближенные в пространстве ![]() Рис. 12-2. 3Д – структура - L - образная форма два двух-цепочечных домена под углом 90 ° ![]() ^ Рис.12-3.
Рис. 12-4. Принципы пространственного строения одноцепочечных РНК, основные энергетические детерминанты структуры копланарные взаимодействия пар оснований
X··W=C : A9··A23-U12 , G46·· G22-C13 в переходной области между Д-стеблем и акцепторным стеблем
- 4 основания из 5 в вариабельной петле, - 4 основания Д-петли,
вовлечены в копланарные взаимодействия с 2-мя Н-связями ![]() Рис. 12-5. стопочное взаимодействие оснований
эффективные стопочные взаимодействия чем в двойной спирали
взаимодейсвии с соседними по цепи основаниями
соседними основаниями для оптимизации стопочных взаимодействий Основание G18 интеркалирует между G57 и A58. Основание G57 интеркалирует между G18 и G19 Д-петли. Получаются хорошие стопочные взаимодействия в системе G19 G57 G18 A58 ![]() Рис. 12-6. В пространственной структуре тРНК находят подтверждение основные принципы строения 3Д структуры нуклеиновых кислот –
согласованность локальных и дальних по цепи взаимодействий
взаимной интеркаляции, Структура длинных РНК - подтверждает принципы строения НК ![]() Рис.12-7. ![]() Рис.12-8.^
Рис.12-8. Строение нуклеиновых кислот – NS-3-2 Взаимодействие нуклеиновых кислот с водой и противоионами. Гидрофильные группы ДНК. Особенности гидратации разных форм ДНК. Распределение электростатического потенциала вокруг ДНК. Кристаллическая вода и ионы Mg+2 связанные с тРНК-фен ![]() Рис. 12-9. ^ ![]() дистанция Fe – O ~ 2.3 A характерна для ионов Mg+2, Mn+2, Na+ ~ 2.2 – 2.4 A ^
ион не теряет своей гидратной оболочки воды , взаимодействие с гирофильными атомами ДНК осуществляется через воду гидратной оболочки иона - слабая связь – иона с НК
атомы О, N из химических групп НК или аминокислот белка, замещает одну ( или несколько) молекул воды из гидратной оболочки иона - сильная связь – иона с НК Закономерности гидратации РНК
Уменьшение концентрации соли ниже 0.1 М приводит к разрушению нативной структуры тРНК ^ B- форма наиболее устойчива в водном растворе При дегидратации RH < 92 % или объемной концентрации спирта в воде выше 70-75% , В-форма переходит в А-форму. При дегидратации ниже RH = 75 % , начинается разрушение регулярной структуры А-ДНК, полностью разупорядочивается при RH = 55 % , отсутствует дифракционная картина.
Атомы кислорода (фосфодиэфирные) Р-О-С и рибозы С-О-С
Хорошо организованная структура ДНК при RH > 75 % имеет 4, 5 молекул воды гидратирующих каждую пару оснований. Вода заполняет монослоем малую и большую бороздки ДНК при RH ~ 75 % , образуя структурированную сетку Н-связей Далее накапливается в бороздках как менее структурированная, обьемная вода АТ пары гидратируются сильнее чем GC пары. АТ пары способны формировать водные мостики между N3(A)…W…O2(T) соседних пар оснований. Поэтому поли(А)*поли(Т) последовательности или тракты более устойчивы в В-форме, остаются в В-ворме при большем высушивании, чем GC последовательности - ^ важный элемент стабилизации В-формы водные мостики между N3(A)…W…O2(T) соседних пар оснований
Рис.12-10. Взаимодействие ионов с ДНК Теория конденсации –
Электростатический потенциал ДНК – Наиболее сильный в малой бороздке – между двумя нитями РО4- групп ^
|