Методические указания к лабораторным работам по дисциплине «Микробиология молока и молочных продуктов» для специальности 2710«Технология молока и молочных продуктов icon

Методические указания к лабораторным работам по дисциплине «Микробиология молока и молочных продуктов» для специальности 2710«Технология молока и молочных продуктов


5 чел. помогло.
Смотрите также:
Рабочая программа курса по выбору “Теоретические основы разработки новых видов молочных...
Рабочаяпрограмма по дисциплине сд. 07 Микробиология молока и молочных продуктов...
Рабочая программа курса по выбору «Тара и упаковка» для специальности 271100 «Технология молока...
Рабочая программа дисциплины “Технология молока и молочных продуктов” для специальности 271100...
Рабочая программа дисциплины «Биология и микробиология» для специальностей: 260301 «технология...
Методические рекомендации и контрольные задания по дисциплине сд 03...
Рабочая программа по дисциплине «Технология отрасли» раздел «Технология молока и молочных...
Рабочая программа дисциплины специализации «Технология молочных консервов и заменителей цельного...
Рабочая программа дисциплины Пищевые добавки и наполнители в производстве молочных продуктов...
Отчет о самообследовании основной образовательной программы по специальности 260303 Технология...
Рабочая программа дисциплины «Новые физико-химические методы обработки при производстве молочных...
Рабочая программа дисциплины «Методы исследования свойств сырья и молочных продуктов» для...



Загрузка...
страницы: 1   2   3   4
вернуться в начало
скачать

Лабораторная работа №12

^ Микробиологический контроль сгущенного, сухого молока и мороженого

Цель работы: произвести посевы сгущенного, сухого молока и мороженого на МПА для определения общего количества бактерий.


^ Оборудование и материалы

Пробы сгущенного молока, чашки Петри, предметные и покровные стек­ла, микроскопы, бактериологические петли, среды - МПА, молочный агар в пробирках, пробы сухого молока, мороженого, стерильная вода - 90мл, колба на 250мл, стерильные пробирки, пипетки для разведений, вата, спирт, эфир.

^ Исследование микрофлоры сгущенного молока с сахаром.

Стойкость сгущенного молока достигается пастеризацией и добавлением сахарозы в количестве 18% по отношению к сырому молоку. При этом подавля­ется жизнедеятельность большей части микрофлоры молока. Если отношение содержания сахарозы в сгущенном молоке к суммарному количеству сахара и воды равно 63-64%, то количество бактерий при хранении продукта не увели­чивается.

Во избежание попадания микрофлоры в продукт, для его приготовления используется пастеризованное молоко высшего качества. Исследование сгу­щенного молока с сахаром проводится по той же методике, что и обычного мо­лока.

Для отбора проб из банки со сгущенным молоком крышку фламбируют ватой, смоченной спиртом. Банку открывают стерильным ножом и немедленно закрывают крышкой стерильной чашки Петри. После тщательного перемеши­вания ложечкой отбирают навеску Юг в стерильную колбу. Смешивают с 90 мл стерильной воды 37-40°С. Из приготовленной таким образом суспензии готовят разведения обычным способом.

Посевы производят на МПА - разведения 1:10, 1:100, 1:1000 для опреде­ления общего количества бактерий, на молочный агар - разведения 1:10, 1:100 для количественного учета протеолитических бактерий; на стерильно-цельное молоко - разведения 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000 для подсчета маслянокислых бактерий; на сусло - агар - разведение 1:10 для подсчета дрожжей и плесневых грибов; на среду Кесслера - разведения 1:10, 1:100 для определения Escherichia coli. Посевы в чашках Петри выращивают в термостате при 30°С в течение 3 суток. Затем проводят подсчет и микроскопию препаратов из колоний.

Особую опасность представляют плесневые грибы, дрожжи и пигментообразующие микрококки, вызывающие загустевание молока и пептонизацию казеина. Дрожжи вызывают бомбаж, грибы - плесневение. Источником попа­дания в продукт этих микроорганизмов является чаще всего, хранившийся са­хар. Кроме того, плесневые грибы вызывают образование колоний в виде по­душечек различных размеров и окраски у дна банки по швам.

Развитие пигментовых микрококков способно вызывать загустевание с появлением неприятного, сырного запаха. При этом образуется молочная ки­слота. А под действием сычужных ферментов изменяются белки молока.

Согласно стандартам, сгущенные с сахаром молочные консервы по микробиологическим показателям должны удовлетворять следующим требовани­ям. Общее количество бактерий в 1 г допускается не более 50000. При посеве в среду Кесслера в три параллельные пробирки по 1 г консервов в каждую, присутствие кишечной палочки допускается не более, чем в одной пробирке.


^ Исследование сухого молока

В сухой стерильной бюксе взвешивают 1 г сухого молока. Переносят на­веску в пробирку с 9мл стерильной воды при 37-40 С, взбалтывают до растворения 10-15 минут. Из этой пробирки готовят последующие разведения

Посевы производят на МПА - разведения 1:10, 1:100, 1:1000 для опреде­ления общего количества бактерий; на молочный агар - разведения 1:10, 1:100 для количественного учета протеолитических бактерий; на среду Кесслера -разведения 1:10 и 1:100 для определения титра; на стерильное молоко - разве­дения 1:10, 1:100, 1:1000 для количественного учета молочнокислых бактерий.

Согласно стандарту сухое молоко в зависимости от бактериальной обсемененности разделяют на высший и первый сорт.

Общее количество бактерий в 1 г сухого молока допускается не более 50000 для молока высшего сорта и 100000 для 1 сорта. Содержание патогенных бактерий и кишечной палочки не допускается.


^ Исследование мороженого

С поверхности продукта стерильной ложечкой снимают навеску 50г. От расфасованного мороженого берут из упаковки один, два образца. Навеску мо­роженого расплавляют в стерильной склянке при 40-45°С в течение 10-15 ми­нут и из этой пробы готовят разведения в стерильной воде 40Ч5°С. Посевы делают на МПЛ - разведения 1:1000, 1:10000, 1:100000. Титр кишечной палоч­ки устанавливают путем посева разведений 1:10, 1:100 на среду Кесслера.

Посевы в чашках Петри выращивают в течение 3 суток при 30°С в термо­стате, на среде Кесслера - при 43°С.

При посеве в три параллельные пробирки со средой Кесслера по 0,1 г мо­роженого наличие кишечной палочки допускается не более, чем в одной про­бирке. В мороженом не должно содержаться патогенных и токсигенных микробов.


^ Вопросы для самопроверки

1 Отбор и подготовка для исследования проб сгущенного молока, сухого молока и мороженого.

2 Питательные среды, используемые для определения общего количества бактерий, протеолитических, маслянокислых бактерий, дрожжей и плесневых грибов.

3 Определение Coli-титра и бактериологическая оценка доброкачественности продукта.

4 Что представляют собой молочные консервы?

5 На каких принципах основано консервирование молочных продуктов?

6 Что подразумевают под абиозом, асмоанабиозом и ксероанабиозом?

7 Назовите источники обсеменения микроорганизмами сгущенного стерилизованного молока и сгущенного молока с сахаром.

8 Перечислите пороки сгущенного стерилизованного молока.

9 Как влияют различные группы микроорганизмов на качество сгущенного
молока с сахаром, сухого молока?

10 Какие микробиологические показатели определяют при контроле качества сгущенного молока?

11 Как контролируют производство сухих молочных консервов и мороженого?

^ Лабораторная работа №13

Санитарно-гигиенический контроль воды, воздуха,

смывов с рук и оборудования


Материалы и оборудование

Пробирки с мясопептонным агаром, чашки Петри лупа х10, термостаты на 25° и 37, 43"С, прибор Ю. А. Кротова, камера Горяева, покровные стекла, бактериологическая петля, среда Кесслера (Булира), чашки со средой Эндо, пробирки со стерильной водой или физиологическим раствором, пинцет, пробирка, пробирки с меткой на 10 мл.

^ Задание I. Провести анализ микрофлоры воздуха

Микробиологический контроль воздуха. Воздух - неблагоприятная среда для развития микроорганизмов; в нем нет питательных веществ, постоянной оптимальной температуры, часто отсутствует влага в капельножидком состоянии, действуют солнечные лучи и т.д. Микроорганизмы попадают в воздух, в основном, с пылью. Воздух производственных помещений пищевых производств может быть источником загрязнения сырья, п/ф и готовой продукции, что приводит к их порче, сроков хранения, а также может вызвать различные заболевания человека. Для определения количества микроорганизмов в воздухе используют различные методы.

Седиментационный метод - метод оседания, сравнительно просто и не требует специальной аппаратуры.

Для расчета используют формулу, предложенную В.Л. Омелянским, согласно которой в течение 5 минут на поверхность чашки площадью 100 см оседает столько микроорганизмов, сколько их содержится в 10 л воздуха. Количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха



где а - число колоний, выросшие в чашке Петре (среднее из двух);

S - площадь чашки Петри, взятой для анализа, см ;

100 - пересчет площади чашки на 100 см2;

Т - время, в течение которого чашка была открыта, мин;

100 - пересчет на I м3.


На чашке оседают в основном крупные пылевые частицы, поэтому этот метод непригоден для точного количественного изучения микрофлоры воздуха.

^ Порядок проведения работы. Две стерильные чашки Петри подписать, указав группу, фамилии и дату посева.

Взять две пробирки растопленного и слегка охлажденного мясопептонного


агара, одновременно вынуть из них пробки, обжечь края пробирок в пламени горелки и вылить содержимое (15-20 мл) на дно чашки, слегка ее приоткрыв. Быстро закрыть чашку, взять ее в правую руну, и, слегка покачивая, равномерно, распределить среду по дну чашки. Чашку поставить на стол и подождать до-полного уплотнения среды.

Подсушить чашку в термостате при 45°С. Внутри термостата чашку опрокинуть (агаровая пластинка должна быть обращена вниз) и выдержать в термостате 5-8 минут. В помещении, где производится определение микрофлоры воздуха, открыть чашку на 5 минут. Одновременно провести определение микрофлоры в наружном атмосферном воздухе.

Чашки поставить в термостат при температуре 37°С для развития бактериальной флоры. Через 24 часа переставить чашка в термостат при температуре 25°С и выдержать еще 24 часа для прорастания плесневых грибов.

При помощи лупы подсчитать количество выросших колоний и сделать расчет в рабочей тетради количества микроорганизмов, находящихся в I м3 воздуха по формуле, предложенной В.Л.Омелянским,

Аспирационный метод основан на использовании щелевого аппарата конструкции Ю.А.Кротова.

Чашку Петри с питательной средой оставить в аппарате, перенести его в помещение, где будет определяться микрофлора воздуха, включить на 1 -3 мин. Затем крышку аппарата снять, засеянные чашки вынуть, закрыть и надписать; I) группа, 2) фамилия учащегося, 3) место проведения определения.

Чашки поместить в термостат на 24 часа при 37°С для инкубации, после чего их оставить при комнатной температуре еще на. 48 часов.

По скорости и продолжительности просасывания воздуха под­считать общий объем, из которого производился посев, к рассчитать содержание микроорганизмов в I м3 воздуха.

Воздух производственных помещений считается чистым, если в нем содержится не более 500 микроорганизмов в I м3.

^ Задание 2. Провести анализ воды на общее содержание микроорганизмов в I мл воды.

Микробиологические показатели воды. По ГОСТ Р -_____ для питьевой воды титр кишечной палочки должен быть не ниже 300, коли-индекс - не более 3, общее количество бактерий в I мл- не более 100. Вода не должна содержать патогенных микроорганизмов.

^ Порядок проведения работы. Бутылку (колбу на 0,25, 0,5 или I л) тщательно вымыта, закрыть ватно-марлевой пробкой, накрыть бумажным колпачком, завязать у горловины и стерилизовать в автоклаве при 120°С в течение 30 мин. Стерилизации можно провести сухим парой в печи Пастера (обычный сушильный шкаф) при 150 С в течение двух часов или при 100°С в течение одного часа. Для проб хлорированной воды в бутылки перед стерилизацией внести 2 мл 1,5%-ного раствора тиосульфата натрия. В посуду, стерилизованную сухим паром, вносят перед отбором пробы 2 мл тиосульфата натрия.

Кран или край спускной трубки обжечь паяльной лампой или кольцевым зажженным ватным тампоном, пропитанным спиртом. Открыть кран и в течение 10-15 минут воду спустить, после чего произвести отбор проба, Бутылку развязать, вынуть пробку имеете о бумажный колпачком, а набрать пробу непосредственно в подготовленную посуду, стараясь, не замочитьватную пробку. Закрыть бутылку пробкой над огнем и завязать. Вода подлежит анализу не после 2-х часов после отбора.

^ Задание 3 Определить общее количество микроорганизмов в смыве с рук.

Порядок проведения работы. Стерильным тампоном, смоченным в стерильной воде (физиологическом растворе) протереть ладони, тыльную поверхность рук, под ногтями и между пальцами обеих рук. Тампон погружают в ту же, пробирку, в которой производилось смачивание, хорошо взбалтывают, отбираю г I мл раствора стерильной пипеткой и готовят разведения (1:10, 1:100). Для определения общего количества микроорганизмов в I мл смыва провести посев разведении на мясопептонный агар. Чашки подписать с указанием разведения даты, группы, фамилии учащегося. Чашку с посевом поместить в термостат при 37°С на 48 часов. Остаток смыва вместе с тампоном высеять в пробирки с поплавками (рис. 9.), добавить в них по 5 мл среды Кесслера в выращивать в течение 24 часов при температуре 43°С.

Затем подсчитать количество выросших колоний и определить наличие кишечной палочки.

Чистоту рук оценивают по количеству микроорганизмов в I мл смыва при отсутствии кишечной палочки:




Рис.9.


Количество микроорганизмов Оценка чистоты

в I мл смыва с рук

1000 отлично

1000-5000 хорошо

5000-10000 удовлетворительно

свыше 10000 плохо

В рабочую тетрадь занести результаты определения и сделать соответствующие выводы.


^ Задание 4. Определить общее количество микроорганизмов в смыве с оборудования

Порядок проведения работы. Перед взятием пробы трафарет смочить спиртом, обжечь и наложить на исследуемую поверхность. Ограниченную площадь промыть смоченным в воде (или в физиологическом раствора) тампоном, после чего тампон опустить в ту же пробирку и хорошо перемешать. Высеять I мл смыва па мясопептонный агар в чашку Петри, поместить ее в термостат при 37°С на 48 часов, затем определить общее количество микроорганизмов. Остатки смывной жидкости вместе с тампоном засеять в пробирки с поплавками и 5 мл среды Кесслера и выдержать при 43°С 18-24 часа. Па пробирке указать дату- группу, место смыва. Результаты определения и выводы записать в рабочую тетрадь.

По окончании выдержки посевов на среду Кесслера пробирки рассмотреть и отметить газообразование и помутнение. Если рост микроорганизмов при исследовании смывов отсутствует, анализ заканчивают и считают, что в исследуемых смывах кишечная палочка отсутствует.

^ Задание 5. Определить наличие кишечной палочки

Порядок проведения работы. Если в среде Кесслера наблюдается помутнение или газообразование, то сделать посев штрихом на среду Эндо, чтобы выросли изолированные колонии. Дно чашки разделить на несколько секторов, из пробирок сделать высев на отдельный сектор. Чашку с посевом поместить в термостат на 24 ч при 37°С. Просмотреть засеянную чашку со средой Эндо в описать выросшие колонии. Отметить наличие или отсутствие типичных для кишечной палочки колоний, имеющих тёмно-красный цвет с золотистым металлическим блеском.


^ Вопросы для самопроверки

1 Сколько микроорганизмов допускается в 1 м3 чистого воздуха.?

2 Какими методами определяют количество микроорганизмов в воздухе?

3 Количественные микробиологические показатели микрофлоры воды и методы их определения?

4 Дайте определения понятиям колититр, колииндекс. Чему равны эти показатели для питьевой воды?

5 Каковы морфологические и физиологические признаки кишечной палочки?

6 На что указывает наличие кишечной палочки на руках и на оборудовании?

7 Укажите порядок проведения смыва с рук и оборудования.

8 Какова последовательность обнаружения кишечной палочки в смыве?


ПРИЛОЖЕНИЕ 1


Пробы, отбор и подготовка к анализу

Для микробиологических испытаний отбирают единицы продукции, не имеющие по внешним признакам дефектов упаковки и продукта. Единица продукции - отдельные экземпляры штучной продукции или определенное количество нештучной или штучной продукции.

Пробы для микробиологических испытаний отбирает микроби­олог или другое ответственное лицо. Пробой называется опреде­ленное количество единиц продукции, отобранной для контроля. Пробой продуктов специального назначения считается отдельный экземпляр продукции в упаковке, защищающей продукт от внеш­ней среды (1 туба, 1 банка, 1 пакет, 1 плод и т.д.).

Для микробиологического контроля от любой партии продуктов из разных мест отбирают выборку, состоящую не менее чем из трех проб. Выборка - количество проб (изделий), отобранных для контро­ля из партии или потока продукции. Отобранную пробу помещают в посуду или упаковывают в фольгу, плотную бумагу, не допуская повреждения упаковки. Каждую отобранную, пробу (единицу про­дукции) маркируют в соответствии с кодом контролируемой партии и нумеруют.

По результатам отбора проб составляют протокол, в котором указы­вают: номер протокола; место, дату и время отбора проб; цель микроби­ологического анализа; наименование продукта, изготовителя, тип тары; дату изготовления, смену и номер партии; результаты органолептического осмотра и обнаруженные дефекты тары и продукта.

Пробы хранят до начала анализа при комнатной температуре не более 24 ч, скоропортящиеся продукты - при температуре от 0 до +5°С не более 6—8 ч, быстрозамороженные - при температуре минус 12-18°С не более 24 ч.

Затем взвешивают навеску (навеска - это часть пробы опреде­ленной массы, используемая для приготовления исходного разведе­ния или непосредственного высева в питательные среды) на специ­альной посуде, взятую стерильным инструментом. Твердые пище­вые продукты предварительно измельчают в стерильной фарфоровой ступке (или другим способом). Для приготовления ис­ходного разведения навеску (10 г) переносят в стерильную колбу со стерильным пептонно-солевым раствором (90 мл). Тщательно пере­мешивают круговыми движениями, дают отстояться 4-5 мин, по­лучают 10-1 разведение. Жидкость над осадком используют для при­готовления последующих разведений, для этого 1 мл жидкости из колбы переносят в пробирку с 9 мл пептонно-солевого раствора, тщательно перемешивают, получают разведение 10-2. Так повто­ряют несколько раз, получая те разведения, которые наиболее вероятны для данного продукта. Для высева в питательные среды используют разведения навески, которые позволяют получить в чашке Петри от 30 до 300 колоний. Количество специфических микроорганизмов должно быть меньше: например, стафилококков от 15 до 150 колоний, плесневых грибов от 5 до 50 колоний.

Высев можно производить либо в глубину, либо на поверхность питательной среды. Посев в глубину выполняется переносом 1 мл жидкости из соответствующего разведения в стерильную чашку Петри и заливается расплавленной и охлажденной до 45°С питательной средой и тщательно перемешивается круговыми движениями.

Высев на поверхность плотной, питательной среды осуществля­ется путем переноса 0,1-0,2 мл жидкости из соответствующего разведения и растирания сразу же досуха стерильным стеклянным шпателем по поверхности всей среды.

Методы определения отдельных групп микроорганизмов


^ Метод 1. Определение общего количества мезофилъных аэробных факультативно-анаэробных микроорганизмов

(КМАФАнМ) [27]

Настоящий метод распространяется на пищевые продукты, содержащие в 1 г 300 и более или в 1 мл 30 и более микроорганизмов и устанавливает порядок определения жизнеспособных клеток мезофилъных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов.

Метод основан на высеве определенного количества продукта или

его разведений в агаризованную питательную среду, культивировании посевов в аэробных условиях при 30°С в течение 72 ч, подсчете всех выросших видимых колоний мезофильных аэробных и факуль­тативно-анаэробных микроорганизмов и пересчете их количества на 1 г (мл) продукта.

Масса (объем) навески, предназначенной для приготовления ис­ходного разведения, должна составлять не менее 10 г (мл), а пред­назначенной для непосредственного высева в питательные среды - не менее 1 г (мл).

Из навески продукта готовят исходное и ряд десятикратных разведений. По 1 мл продукта и или его разведений высевают одновре­менно в две стерильные чашки Петри. В каждую чашку Петри, со­держащую инокулум, добавляют не позднее чем через 15 мин рас­плавленную и охлажденную до 45°С плотную питательную среду. Среду немедленно и равномерно перемешивают с посевным материалом и оставляют для застывания в горизонтальном положении.

После застывания агаризованной среды посевы инкубируют, пос­тавив чашки дном вверх, при 30°С в течение 72 ч.

Результаты оценивают по каждой пробе отдельно. На чашках, где выросло от 30 до 300 колоний, подсчитывают все колонии, суммируют и находят среднее арифметическое: Подсчитать колонии можно с помощью лупы с пятикратным увеличением. Полученное сред­нее арифметическое числа колоний округляют: если меньше 100, его округляют до ближайшего числа, деля­щегося на 5;

если больше 100 и его последняя цифра 5, округляют до ближай­шего числа, делящегося на 20;

если больше 100 и его последняя цифра не 5, округляют до бли­жайшего числа, делящегося на 10.

Количество микроорганизмов в 1 г (мл) продукта вычисляют ум­ножением округленного среднего арифметического числа колоний на разведение навески и делением на количество вносимого посевного материала (масса, объем) в чашку. Например, округленное среднее арифметическое числа колоний с двух чашек, засеянных по 1 мл из 10 разведений, равнялось 220. Общее количество микроорганизмов в 1 г продукта будет равно





Общее количество микроорганизмов записывают в виде чис­ла:

(от 1 до 9,9) ·10. Например, 220 000 клеток в 1 г записывают как 2,2 · 105 КОЕ/г.


^ Метод 2. Определение бактерий группы кишечной палочки

(БГКП) посевом в жидкие среды [23]

Настоящий метод распространяется на пищевые продукты, не содержащие в 1 г (мл) или содержащие в 1 г (мл) менее 1000 колиформных бактерий, и устанавливает порядок определения наиболее вероятного числа (НВЧ) жизнеспособных клеток коли­формных бактерий. Колиформные бактерии - это грамотрицательные палочки, ферментирующие лактозу при 30-37°С в течение 24-48 ч с образованием кислоты и газа.

Метод основан на высеве определенного количества продукта и или его разведений в ряд пробирок с жидкой селективно-диаг­ностической средой с лактозой, культивировании в аэробных усло­виях при 30°С в течение 24-48 ч, учете положительных пробирок и определении наиболее вероятного числа в 1 г (мл) продукта колиформных бактерий, ферментирующих лактозу с образованием газа и кислоты.

Масса (объем) навески для приготовления исходного разведения должна составлять не менее 10 г (мл), а для непосредственного высева в питательные среды — не менее 1 г (мл) из навески продукта.

^ Список рекомендуемой литературы


  1. Н.М. Вербина, Ю.В. Каптерева. Микробиология пищевых производств - М.,ВО Агропромиздат, 1988-256с

  2. П.П. Степаненко. Микробиология молока и молочных продуктов - М., Ко­лос, 1996-271с

  3. П.К. Полещук, Э.С. Дербинова, Н.И. Казанцева Микробиология молока и
    молочных продуктов - М., Пищепром, 1978г.

  4. Х.Заупе, Г. Мюнх. Микробиология пищевых продуктов животного происхождения, 1977г.

  5. Н.С. Королева, В.Ф. Семенихина. Микробиология, основы молочного производства, 1987г.

6.В.М. Богданов. Микробиология молока и молочных продуктов - М., Пищевая промышленность, 1969-367с.

7.А.Я. Панкратов, B.C. Григоров, Р.Л. Кащенко. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - М., Пищевая промышленность, 1975г.


Микробиология молока и молочных продуктов


Методические указания

к лабораторным работам по дисциплине

«Микробиология молока и молочных продуктов»

для специальности 260303 «Технология молока и молочных продуктов»

Составитель:

Плосконосова Любовь Ивановна







Скачать 0,78 Mb.
оставить комментарий
страница4/4
Дата29.09.2011
Размер0,78 Mb.
ТипМетодические указания, Образовательные материалы
Добавить документ в свой блог или на сайт

страницы: 1   2   3   4
средне
  3
хорошо
  1
отлично
  4
Ваша оценка:
Разместите кнопку на своём сайте или блоге:
rudocs.exdat.com

Загрузка...
База данных защищена авторским правом ©exdat 2000-2017
При копировании материала укажите ссылку
обратиться к администрации
Анализ
Справочники
Сценарии
Рефераты
Курсовые работы
Авторефераты
Программы
Методички
Документы
Понятия

опубликовать
Загрузка...
Документы

Рейтинг@Mail.ru
наверх